网站 设计引物在线播放_物理nb实验室网页(2024年12月免费观看)
쐃R与RT-PCR的探秘之旅 쥜觔物技术的广阔天地里,PCR与RT-PCR都是不可或缺的工具。最近,我深入探索了这两种技术,尤其是RT-PCR,它究竟有何魅力呢? ᩦ先,RT-PCR与PCR的融合,使得在单个EP管中就能完成逆转录和聚合酶链式反应,这无疑大大简化了操作步骤。然而,这一步也带来了不小的挑战。每次转录一个RNA分子就需要消耗一个逆转录酶,这无疑增加了实验的成本和复杂性。 在NCBI的网站上,我找到了许多关于RT-PCR的详细资料。虽然我在理解引物设计方面还有一些疑惑,比如如何选择合适的exon-exon进行设计,以及克隆时如何间接设计引物等。但我相信,随着不断的探索和学习,这些难题都将迎刃而解。 ꦀ来说,RT-PCR以其独特的优势在生物技术领域占据了一席之地。虽然它的一些缺点也让实验者头疼不已,但正是这些挑战激发了我们的探索欲望。 PS:在学习之余,也别忘了欣赏一下美丽的风景,比如《铃芽之旅》中的美景,它们也能给我们的心灵带来愉悦和放松哦!
网络药理学分析药物靶点:从基因到PCR 大家好,我现在遇到了一点小麻烦,希望有经验的朋友能帮我解答一下。老师让我结合网络药理学来分析药物的潜在靶点,具体来说,就是要在PubMed上搜索这些靶点相关的基因。可是,我用genecard搜索的时候,出来的结果都是基因,而不是老师希望的靶点。我是不是理解错了老师的意图?我现在要做PCR,但不知道该怎么做,求大家指导一下! 根据老师的指示,我需要先通过网络药理学分析找出最可能的靶点,然后结合这些靶点分子的文献,挑选出10个基因。接下来就是做PCR了,订引物的时候,网上有很多引物设计网站,大家有没有推荐的? 希望有经验的朋友能帮我解答一下,真的很急!
如果研一的时候,有人告诉我这些就好了 嘿,大家好!今天想跟大家分享一些我在研究生期间发现的宝藏工具,真的是科研路上的好帮手。如果有人在我研一的时候告诉我这些,估计我的科研之路已经成功一半了! 1⃣️ 分子生物学软件:SnapGene 首先推荐的是SnapGene,这个软件真的是分子生物学实验员的必备神器。举个例子,以前设计一对引物需要花二十分钟,还得反复比对,生怕出错。现在有了SnapGene,一分钟就能设计出5对引物,效率提升不是一点点。 2⃣️ 数据分析软件:GraphPad 和 Origin 接下来是数据分析软件。GraphPad Prism8和Origin是我常用的两款。特别是GraphPad,做科研汇报和论文作图简直必备。以前我只会用Office作图,质量差不说,放到PPT上还不清晰,经常要改来改去。现在有了GraphPad,作图效率和质量都大大提升。 3⃣️ 修图排版软件:PS和AI 然后是修图和排版软件。Adobe Photoshop和Illustrator真的是绝配。论文图片的排版、修图微调都可以用这两个软件搞定。我自己写论文的时候,也是借助这两个软件进行排版设计的,方便又高效。 4⃣️ 实验protocol查询网站 最后分享几个靠谱的实验protocol查询网站。Bio-protocol支持中文,很多protocol都是中文的,非常好用。Nature Protocols、Cold Spring Harbor Protocols、JOVE视频教程、Current Protocols和ProtocolExchange都是非常权威的网站,基本上在实验室里导师没时间教你,师兄师姐不一定会的小技巧都能在这些网站上查到。 文献阅读小技巧 最后给大家一些文献阅读的小技巧: 文献查找分类:知网、谷歌学术、SCI-Hub、Web of Science、Pub Med等都是常用的检索工具。 文献泛读:先检索100-200篇相关文献,一般只看abstract部分,然后用有道翻译提炼重点,筛出20-30篇精读。 文献精读:先看abstract掌握主要思路,再看result了解作者观点,最后找出创新点,得到属于自己的ideas。 希望这些小工具和小技巧能帮到大家,让你们的科研之路少走弯路!如果你们有其他好用的软件或者工具,也欢迎在评论区分享哦!
qPCR引物设计指南:轻松搞定引物设计! 大家好!最近是不是想我了?我回来啦!这段时间确实有点忙,发生了不少事情,但不管怎样,还是继续给大家带来实用的小技巧吧!今天我们来聊聊qPCR引物设计的那些事儿。 首先,做qPCR的第一步就是设计引物。市面上有很多设计引物的软件,但今天我要推荐一个我个人觉得非常好用且方便的软件——MRPrimerW2。这个网站支持九种物种的引物设计,简直是科研神器! 使用方法也很简单。你可以通过输入基因名或者fasta序列格式来设计引物。而且,这个网站还支持一次性输入多个基因,一次性设计出很多基因的引物,简直不要太方便! 更棒的是,这个网站还提供了自定义设置,方便我们设计出自己想要的引物。设计完之后,只需要点击primer search,就能检索到你想要的引物。 结果出来后,每个基因都会有相应的引物。你可以选择top 1、top 10或者top 50的引物评分来呈现结果。最后,别忘了在NCBI上进行复查,确保引物的准确性。 是不是觉得省时省力又省钱?祝大家科研顺利,结果完美!科研嘛,信其有不信则无,但有了好的工具和方法,成功的几率总是大一些的。加油!ꀀ
如何设计qPCR引物:实用指南 大家好!今天我们来聊聊如何设计qPCR(定量PCR)的引物。其实,qPCR的引物设计和普通PCR差别不大,都可以用NCBI来方便地设计。不过,由于qPCR鉴定的是mRNA的表达,所以在设计引物时需要特别注意以下几点: 第一步:打开NCBI 首先,打开NCBI(美国国立生物技术信息中心)网站,搜索你需要的基因(例如Lepr)。 第二步:找到基因卡片 点开基因卡片,找到最下方的mRNA和Protein描述。根据你的需求选择合适的Isoform,然后复制NM码。 第三步:进入引物设计页面 在NCBI的引物设计(Primer design)栏目输入刚才复制的NM码。我个人更喜欢下载cDNA文件,然后用SnapGene手动拉取引物,这样可以直接看到cDNA序列,更加直观。 第四步:确认引物CG值 在SnapGene中确认引物的CG值(大约50%),Tm值在60度左右。可以多设计几对引物,以防有些引子不工作。 希望这些小技巧能帮到大家,祝科研顺利!ꀀ
科研指南젥悤𝕨CR引物 设计PCR引物是进行qPCR实验的关键步骤。如果你需要针对某个新基因设计引物,以下是一个详细的流程: 【获取基因序列】 1️⃣ 打开NCBI网站,搜索目的基因,选择所需的物种; 2️⃣ 找到基因的NM号,复制下来;或者点击NM号,复制基因的序列信息; 죀寻找匹配的引物】 3️⃣ 再次打开NCBI网站,点击右侧的BLAST工具,然后选择Primer-BLAST; 4️⃣ 在新页面中粘贴刚才复制的NM号或基因序列信息,设置引物参数: A 引物长度:80-150碱基对 B Organism:输入你需要的物种(例如:人 Homo sapiens,小鼠 Mus musculus,大鼠 Rattus norvegicus) C 其他参数保持默认设置; 5️⃣ 点击“Get Primers”按钮,获取引物; 6️⃣ 根据引物设计的原则,筛选出合适的引物。 通过以上步骤,你就可以成功设计出针对目的基因的PCR引物啦!
쥼物设计全攻略✨ 打开PubMed网站,点选NIH,开始你的基因探索之旅! ᠩ择“Gene”,输入你心仪的目的基因,比如mouse、rat或human哦~ 点击基因名字,进入下一步,别急! 点击NCBI,连接世界基因库,轻松获取信息。 在mRNA and protein区域,找到并点击第一个序号。 𛃄S,进入关键步骤,别错过! 复制棕色序列,一定要全部复制,这是关键数据哦! 打开生工网站,选择技术服务-常规引物合成,开始你的引物设计之旅! 寸 点击在线生成引物,选择SYBR,让引物设计更精准。 选择物种,输入基因名称,粘贴刚才复制的序列,提交你的设计! 在引物设计列表中查看已提交的序列,等待奇迹出现吧!
𑠥騮᥅覔导从理论到实践! 引物设计的基本原则 选择目的基因的共有外显子区域进行设计。 引物长度建议在20到25bp之间,GC含量保持在40%到60%,Tm值最好在60℃左右。 设计引物时,尽量跨越外显子,上下游引物可以位于不同的外显子上。 引物的self complementarity和self 3' complementarity相加值应不超过8,单个值不超过5。 扩增产物长度建议在80到300bp之间,最佳为80到150bp。 避免设计含有4个或以上相同碱基(如AAAA、TTTT、GGGG、CCCC)的引物,以及避免明显的二级结构。 设计流程 寸 使用NCBI在线设计工具: 进入NCBI网站,搜索目的基因(如GAPDH)。 查看详细信息,找到共有外显子区域。 选择转录本信息,查看外显子位置。 进入引物设计页面,填写相关信息。 设置引物参数,如PCR产物大小、跨越外显子等。 点击“Get Primers”获取引物序列。 结果解读 在Graphical view of primer pairs部分查看每对引物跨越外显子的情况。 在Detailed primer reports部分查看引物质量和匹配情况。 通过以上步骤,你就可以轻松完成引物设计啦!
降落PCR:解决PCR扩增问题的新方法 降落PCR,也被称为TouchDown PCR,是一种常见的PCR优化方法,操作简单且效果显著。MedPeer网站上有详细的解释和视频教程,供大家参考。 𘠐CR扩增原理 在PCR扩增过程中,DNA双链解螺旋成单链后,引物在退火温度下特异性结合到DNA单链上,并在Taq酶的作用下进行延伸。退火温度越高,引物结合的特异性越好;退火温度越低,非特异性片段产生的可能性越高。 𘠩落PCR的优势 降落PCR通过设定一个较高的初始退火温度,并在每个循环中逐渐降低温度,使得在前期的高温下扩增出特异性片段,而在后期的低温下提高PCR的特异性和效率。 𘠐CR体系配置(以20ul体系为例) 2x Taq Mix:10ul 引物F/R:0.5ul(可在0.5上下调整) 模板:2ul(如果PCR条带不够亮,可以增加一点模板) 加水至:20ul 𘠐CR程序设置 预变性:94℃ 3min 循环1:94℃ 30s 循环2:65℃ 30s 循环3:72℃ 30s(10个循环,每个循环退火温度降低1℃至55℃) 循环4:94℃ 30s 循环5:55℃ 30s 循环6:72℃ 30s(20-25个循环) 延伸:72℃ 10min 保存:4℃至取出跑胶 𘠥ꌦ术和方案 以前做实验前需要查找文献和毕业论文来确定实验方案,做的时候对原理和步骤依旧模糊不清。好在MedPeer网站上提供了各种实验的详细介绍和视频教程,如果早知道这些资源,就不用巴巴地求着师兄师姐和同学教了。
生工PCR引物订购全攻略 嘿,大家好!今天我们来聊聊如何在生工订购PCR引物。这个过程其实挺简单的,但为了确保大家不踩坑,我会详细讲解一下。 订购前的准备工作슩斥 ,你得知道你要订购的基因序列。生工提供了多种引物类型,比如常规引物、NGS引物等等。记住,正链和反链是要分开订购的哦! 如何添加引物到购物车 这个步骤有点关键。你需要在生工的网站上找到“在线订购”部分,然后选择“添加引物”。接下来,你会看到一个页面让你输入引物的相关信息,比如名称、序列等等。填完这些信息后,点击“确定”,引物就会被添加到你的购物车里了。 购物车管理 如果你还想继续添加其他引物,可以在弹出的提示中选择“取消”,然后继续添加。全部添加完成后,选择“确定”并去结算。这里要注意的是,计量单位为OD时只支持干粉交付方式哦! 结算和支付𐊥訴騽橡⯼你可以看到所有引物的详细信息,包括单价、总价等等。确认无误后,选择“去结算”,然后按照提示完成支付。支付成功后,你的订单就正式生成了。 其他注意事项⚠️ 在订购过程中,如果有任何问题,可以随时联系生工的客服。他们会很乐意帮你解决问题。另外,记得查看积分优惠券,有时候可以省下不少钱哦! 好了,这就是在生工订购PCR引物的全部流程。希望对大家有所帮助!如果有任何问题,欢迎留言讨论!退
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