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琼脂糖 🠦近在实验室里经常用到一种叫琼脂糖的东西,真心觉得它是个宝藏! 今天就来和大家聊聊这个神奇的多糖吧! 젧糖的基本概念 琼脂糖是一种从海藻中提取出来的线性聚合物,主要由D-半乳糖和3,6-脱水半乳糖通过1,4和1,3连接交替形成重复双糖单位。它看起来像一条长链,不带电荷,因此也被称为琼胶素或琼胶糖。 琼脂糖的溶点大约在85~90摄氏度,凝固点则在40~42摄氏度。它在高温下容易熔化,但在低温下却能保持稳定。这种特性使得它在凝胶电泳和层析技术中非常有用。 䠧糖凝胶的制作与应用 制作琼脂糖凝胶其实并不难,只需要将适量的琼脂糖粉末加入TAE、TBE或TPE缓冲液中,加热溶解后冷却即可。选择不同浓度的缓冲液会影响凝胶的强度,通常用于分离不同大小的DNA片段。 在正式电泳之前,样品通常与上样缓冲液(loading buffer)混合,这样可以帮助样品均匀沉入上样孔中。上样缓冲液中含有溴酚蓝和二甲苯蓝FF,它们在电泳时会按照固定的迁移速度移动,可以作为条带的指示剂。 电泳条件可以根据具体实验需求调整,但通常电压保持在4-5V/cm,时间则在30-60分钟之间。电泳结束后,凝胶可以在紫外灯下观察并拍照记录结果。 琼脂糖凝胶在DNA回收、细菌转化等方面应用广泛。例如,低熔点的琼脂糖凝胶可以在较低温度下进行DNA回收,这样可以避免高温对DNA的损伤。回收后的DNA可以直接用于细菌转化等后续实验。 琼脂糖与其他多糖的区别 海藻中除了琼脂糖外,还有一种叫琼脂的多糖。两者虽然名字相似,但在组成和用途上却有很大不同。 琼脂是一种混合物,包含琼脂糖和琼脂胶。琼脂糖是其中不带电荷的中性组成部分,而琼脂胶则是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖。因此,琼脂在细菌固体培养基的制备中更为常用,而琼脂糖则多用于凝胶电泳和层析技术中。 低熔点的琼脂糖凝胶在特定场合中也非常有用。例如,在细菌转化实验中,低熔点的凝胶可以在较低温度下回收DNA,保证DNA的稳定性和完整性。 𑠨🙤𝦘麗在实验室里摸索出来的经验和小技巧,希望对大家有所帮助!如果你也有用过这些材料或者有其他问题,欢迎在评论区留言讨论哦!
50个前端迷你项目,快速提升你的技能! "50 Projects in 50 Days - HTML, CSS, and JavaScript" 是一个由 Brad Traversy 和 Florin Pop 共同开发的课程,旨在通过完成 50 个迷你项目来提升学习者的 HTML、CSS 和 JavaScript 技能。这些项目设计简单,适合初学者和中级开发者,通过实际操作和构建真实项目来学习和应用 web 开发技术。 砦𘪩ṧ构建时间大约为一天,涵盖了各种常见的 web 开发任务和效果,如动画、表单验证、交互式用户界面等。这些项目不仅帮助学习者巩固基础知识,还让他们了解如何将不同的技术组合在一起以实现实际功能。 典型项目示例: Expanding Cards - 创建可点击扩展的卡片布局。 Progress Steps - 实现一个具有多个步骤的进度条。 Rotating Navigation Animation - 制作一个带有旋转动画的导航菜单。 Hidden Search Widget - 创建一个带有隐藏动画效果的搜索框。 Blurry Loading - 实现模糊加载效果。 项目特点: 实战练习:通过实际动手项目来巩固和加深对 HTML、CSS 和 JavaScript 的理解。 多样化:项目内容涵盖了动画效果、表单处理、API 调用、响应式设计等多种主题。 渐进难度:项目从简单到复杂,逐步提升,帮助学习者不断挑战自我。 ᠥ悤𝕥駔訿些项目: 独立完成:按照课程的指引,独立完成每个项目,理解每一步的实现方式。 改进和扩展:在完成基础项目的基础上,尝试添加自己的功能和改进,以提高项目的复杂度和实用性。 代码复用:将项目中学到的技巧和代码片段应用到自己的其他项目中,提升代码复用性和开发效率。 课程视频:观看 Brad Traversy 和 Florin Pop 提供的视频教程,跟随讲解一步步完成项目。 代码仓库:访问课程的代码仓库,获取每个项目的源代码和参考资料。 通过这种方式,学习者可以在实际操作中不断提升自己的前端开发技能,为未来的开发工作打下坚实的基础。
如何快速制作霓虹风格动画 嘿,大家好!今天我要和大家分享一个超级酷的技巧,教你如何轻松制作出霓虹风格的绚烂动画。准备好了吗?Let's go! 选择底图 首先,我们需要选择一张好看的底图。我个人偏爱清新森林风格的翠绿色,比如天山翠的那种翠绿,不会太过恐怖的深绿。当然,如果你喜欢其他风格,也可以随意选择。 使用绘图工具 ️ 接下来,我们要用到绘图工具的第三个笔刷。长按这个笔刷,你会得到一个黑色透明遮罩。把这个遮罩储存起来,备用。 添加霓虹灯光 ✨ 现在,把原本的底图置入,然后点按成圆形。接着,使用特效【Loading....】,你就能获得霓虹的围绕灯光效果啦!是不是很酷? 完善你的作品 ❤️ 最后,打上标题和副标题,加上你喜欢的音乐,还可以标注自己或者贴上自己的logo。这样,一个完整的霓虹风格动画就完成啦! 小结 制作霓虹风格动画其实并不难,只需要几个简单的步骤就能搞定。希望这个教程对你有所帮助,赶紧试试吧!
6x 想要自己动手配制 DNA Loading Buffer?这里有一个经济实惠的配方,适合预算有限的实验室。虽然有些商业产品可能更方便,但自己动手不仅能省钱,还能确保质量。以下是详细的配方步骤: 6X DNA Loading Buffer 配方 成分及终浓度 0.3N氢氧化钠:300 10N氢氧化钠 6 mmol/L EDTA:120 0.5mol/L EDTA (pH8.0) 18%聚蔗糖 (400型):1.8g 0.15%溴甲酚绿:15mg 0.25%二甲苯青FF:25mg 水:补足到10ml 젩 制步骤 将所有成分按照上述比例混合。 确保所有化学物质都完全溶解。 调整 pH 至所需值。 加水至总体积为10ml。 注意事项 请在4℃下保存,避免反复冻融。 仅供专业人员使用,确保安全操作。 通过这个简单的配方,你可以轻松制作出高质量的 DNA Loading Buffer,既省钱又实用!
GameJam:奇幻冒险之旅 大家好,这里是河豚生态救助小组,我们参与了这次由TapTap主办的聚光灯GameJam2024游戏开发活动,主题是“Light”。让我们开始这场奇幻的冒险吧! 堦员介绍 Sora:制作人/主程序 奇迹和Bug都是存在的。 赛博数据猫:主策划/主文案 111011001111110 101010000001000 1000110001011010 101001010100000 110110010111001 街灯:策划/文案 神说要有light,于是把灯打开了。 奶牛猫:主美术 喵↑喵↑喵↑喵↓——,喵↑喵↑喵↑,喵~喵~ 喵↑喵↑喵↑喵↓——,喵↑喵↑喵↑,喵~喵,喵喵喵,喵。 灵师爷:程序/美术 成功人狮,传授行业嗷秘,为你的公司毛球更多利益。 皮皮酱:美术 奴隶。 类型 横版探索+冒险解密 ᠥ﹤☧理解 一开始我们倾向于将“Light”向更加无机质的方向塑造,游戏机制也偏向于对光学原理的探索。在经过讨论后,我们将故事的落点调整到现实,并且尝试在现实中加入些较为魔幻和具有人情味的东西。 开发进度 人设:已基本确定。 故事:已基本确定。 关卡设计:Loading……#聚光灯gamejam开发者日志
约基奇三双4连胜,MVP领跑! NBA官方近日宣布,第3周的东西部最佳球员分别是加兰和约基奇。在这段时间里,约基奇的表现堪称惊艳,场均贡献29.5分、15.8篮板和14.5助攻,带领掘金队取得了四连胜。值得一提的是,这四场比赛约基奇全部拿到了三双,而且都是在前三节就达到了这一成就。 在上一场对阵独行侠的比赛中,约基奇全场21投13中,三分球3投3中,砍下37分、18篮板和15助攻,还有3次抢断。本赛季前10场比赛中,约基奇已经6次拿到三双,成为了他职业生涯中拿到三双次数最多的赛季。 约基奇的出色表现不仅让他在NBA历史上三双次数上追平了魔术师约翰逊,还差2次就能升至历史第三。赛后,丹佛媒体DNVR Nuggets为球队制作了一张赢球海报,配上了约基奇本场的表现,配文为:“第4个MVP正在加载中。(MV4 LOADING)” 截至目前,约基奇场均得到29.7分、13.7篮板和11.7助攻,投篮命中率高达56.3%,三分球命中率也有56.4%。其中,场均得分目前排名联盟第4,场均篮板和助攻则分别位列联盟第1和第1。 根据媒体BBR更新的MVP最新概率,掘金中锋尼古拉-约基奇以91.2%的概率断档领先,而凯尔特人前锋杰森-塔特姆则仅有3.2%。约基奇以这样的表现和胜率,无疑成为了本赛季MVP的最有力竞争者。
乐山新宠!蟹黄面来袭 如果你在乐山要找一家氛围感爆棚的餐酒吧,那我强烈推荐你去楼顶LOADING•restaurant bar!这家店的环境和氛围真的无敌了,完全是我的最爱,没有之一!最近他们还上新了很多酒水和餐食,简直让人欲罢不能! 店名 | 楼顶LOADING•restaurant bar 位置 | 文星后街289号万达天璟商铺2楼8号 𖩗 18:00-02:00 | 50元左右(丰俭由人) 关于楼顶 这家店非常有调性,环境和氛围感都超棒!他们主要以酒为主,餐食为辅,但餐酒的品质都很高。每次去都能感受到满满的幸福感。 酒水新品(4款原创特调) 繁花:这款酒颜值爆表,周围有花瓣装饰,喝起来花香四溢,特别适合女生。 浑身是劲:看起来像饮品,实际上是奶茶咖啡风,水乳交融,女生们一定会喜欢。 外滩十八号:把酒做成冰淇淋,吃着吃着就微醺了,超有特色! 鼠尾草与青瓜:这是一款中度烈酒,由金酒、鼠尾草、陈皮和青瓜调制而成,草本风但不浓烈,适合男性或酒量不错的女生。 餐食新品 蟹粉面:乐山首家蟹粉面,一碗面需要5-6只蟹制作,量很足! 冬阴功海鲜锅:他们家的奶香味很浓,特别香! 沙拉:控制饮食的美女们也可以点沙拉,黑椒牛排、柠香三文鱼、鲜虾、鸭胸沙拉总有一款你喜欢的! 小贴士 平时小酌微醺或者是就餐来这儿都超棒!建议和调酒师多聊两句,沟通一下你喜欢的口感和风味,你会收获不一样的惊喜哦! 总之,楼顶真的值得一去!氛围感满满,酒水餐食都很有特色。赶紧去试试吧!
乐山绝美楼顶酒吧推荐!氛围感满分𑱦一家酒吧,被称为颜值和实力的担当壀这家店不仅出片效果好,而且酒也非常好喝,还能根据个人喜好定制特调!和调酒师沟通自己的喜好,你会发现意想不到的惊喜哦✨~简直爱惨了! 𘠳60Ⱖ 死角出片❗一定要去坐吧台,观察调酒师调酒的过程真的超有氛围感壀整体的装潢非常有格调✌最喜欢镶嵌在墙上的超大鱼缸,每个角落都很适合拍照𘣀 𘠩䐩宦訍 𑠩与青瓜 这款鸡尾酒由金酒打底,加入鼠尾草、陈皮和青瓜萃取而成。入口有微微的草木香气,一点也不苦❗,清香禁欲风满满非常适合男生和酒量不错的女生✨。 外滩十八号 第一次喝到冰激凌质地的鸡尾酒❗入口微微甜,有微醺的感觉✌还能感受到冰激凌在舌尖慢慢融化的快乐,超适合女生簟 蟹粉面 这家的蟹粉面真的超级实在❗听说由5-6只螃蟹制作而成,厚厚的蟹黄蟹膏裹在面上,色泽浓郁,一口下去,鲜香四溢。空口吃蟹黄的感觉真的太妙了✌ PS: 鸡尾酒均为隐藏新款特调哦~在dz【OMAKASE隐藏鸡尾酒套餐】后,与调酒师对“暗号”收获惊喜。 店铺信息: 楼顶ⷌOADING restaurant bar 地址: 文星后街289号万达天璟商铺2楼8号
WB实验流程及注意事项详解 样品制备与保存 在样品制备完成后,应立即将其低温保存。短期(几天)内可存放在-20℃,长期则建议使用-80℃。需要注意的是,对于IP(免疫沉淀)实验,样品应直接进行IP操作,以避免冻融破坏蛋白质间的相互作用。 ⠦ 𗥓定量 在样品制备过程中,定量是一个关键步骤。由于WB系统本身存在约20%的误差,因此细微的差别通常可以忽略不计。细胞样品可以先进行计数再接种,短时间内即使细胞生长有差异也不会对WB结果产生太大影响。组织样品则需要从肿瘤组织的大小(称重)开始,精确控制裂解液的体积,并尽量避免蛋白损失。 ꠥ胶电泳 SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳) 基本原理:凝胶由两种不同的凝胶层组成,上层为浓缩胶,下层为分离胶。浓缩胶为大孔胶,缓冲液pH6.8,分离胶为小孔胶,缓冲液pH8.8。 小贴士: 制胶过程中,确保胶面平整,凝胶速度不宜过快。 点样顺序需提前设计,空的泳道需点上等体积的1X loading buffer。 电泳时通常采用恒压电泳,具体电压根据仪器不同略有差异,但不宜过高。 电泳条件 样品间浓度差异过大、盐浓度过高、太过粘稠、有不溶的颗粒物、胶孔不齐等都会影响条带的美观。 根据蛋白分子量大小选择不同浓度的分离胶,例如8%胶适用于300KDa-36KDa之间的蛋白,12%胶适用于180KDa左右的蛋白。 转膜与检测 转膜效率对WB结果的影响不容忽视。对于大蛋白转印,很多书籍建议采用低浓度胶,如6%SDS-PAGE。但实际操作发现,6%胶太软,制作转印三明治的操作非常麻烦,且内参如Actin、tubulin都在45KDa附近,而6%胶底边溴酚蓝指示55KDa左右,除非采用灌注不同浓度的胶或梯度胶,否则需要同时跑两块胶。因此,300KDa以下8%胶(底边36KDa)都可以胜任,可以适当调整选择7-8%胶同时兼顾内参和大蛋白。 通过以上步骤,可以确保WB实验的顺利进行,并获得准确可靠的结果。
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