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引物设计的网站在线播放_引物检测的网站(2024年11月免费观看)

内容来源：北京东为网络所属栏目：导读更新日期：2024-11-29

引物设计的网站

网络药理学分析药物靶点：从基因到PCR 大家好，我现在遇到了一点小麻烦，希望有经验的朋友能帮我解答一下。老师让我结合网络药理学来分析药物的潜在靶点，具体来说，就是要在PubMed上搜索这些靶点相关的基因。可是，我用genecard搜索的时候，出来的结果都是基因，而不是老师希望的靶点。我是不是理解错了老师的意图？我现在要做PCR，但不知道该怎么做，求大家指导一下！𐟙 根据老师的指示，我需要先通过网络药理学分析找出最可能的靶点，然后结合这些靶点分子的文献，挑选出10个基因。接下来就是做PCR了，订引物的时候，网上有很多引物设计网站，大家有没有推荐的？希望有经验的朋友能帮我解答一下，真的很急！𐟙

如何设计qPCR引物：实用指南大家好！今天我们来聊聊如何设计qPCR（定量PCR）的引物。其实，qPCR的引物设计和普通PCR差别不大，都可以用NCBI来方便地设计。不过，由于qPCR鉴定的是mRNA的表达，所以在设计引物时需要特别注意以下几点：第一步：打开NCBI 首先，打开NCBI（美国国立生物技术信息中心）网站，搜索你需要的基因（例如Lepr）。第二步：找到基因卡片点开基因卡片，找到最下方的mRNA和Protein描述。根据你的需求选择合适的Isoform，然后复制NM码。第三步：进入引物设计页面在NCBI的引物设计（Primer design）栏目输入刚才复制的NM码。我个人更喜欢下载cDNA文件，然后用SnapGene手动拉取引物，这样可以直接看到cDNA序列，更加直观。第四步：确认引物CG值在SnapGene中确认引物的CG值（大约50%），Tm值在60度左右。可以多设计几对引物，以防有些引子不工作。希望这些小技巧能帮到大家，祝科研顺利！𐟒ꀀ

科研指南𐟔젥悤𝕨CR引物设计PCR引物是进行qPCR实验的关键步骤。如果你需要针对某个新基因设计引物，以下是一个详细的流程： 𐟔【获取基因序列】 1️⃣ 打开NCBI网站，搜索目的基因，选择所需的物种； 2️⃣ 找到基因的NM号，复制下来；或者点击NM号，复制基因的序列信息； 𐟔죀寻找匹配的引物】 3️⃣ 再次打开NCBI网站，点击右侧的BLAST工具，然后选择Primer-BLAST； 4️⃣ 在新页面中粘贴刚才复制的NM号或基因序列信息，设置引物参数： A 引物长度：80-150碱基对 B Organism：输入你需要的物种（例如：人 Homo sapiens，小鼠 Mus musculus，大鼠 Rattus norvegicus） C 其他参数保持默认设置； 5️⃣ 点击“Get Primers”按钮，获取引物； 6️⃣ 根据引物设计的原则，筛选出合适的引物。通过以上步骤，你就可以成功设计出针对目的基因的PCR引物啦！

𐟌𑠥𜕧‰騮𞨮᥅覔𛧕导š从理论到实践！引物设计的基本原则 𐟓œ 选择目的基因的共有外显子区域进行设计。引物长度建议在20到25bp之间，GC含量保持在40%到60%，Tm值最好在60℃左右。设计引物时，尽量跨越外显子，上下游引物可以位于不同的外显子上。引物的self complementarity和self 3' complementarity相加值应不超过8，单个值不超过5。扩增产物长度建议在80到300bp之间，最佳为80到150bp。避免设计含有4个或以上相同碱基（如AAAA、TTTT、GGGG、CCCC）的引物，以及避免明显的二级结构。设计流程 𐟖寸使用NCBI在线设计工具：进入NCBI网站，搜索目的基因（如GAPDH）。查看详细信息，找到共有外显子区域。选择转录本信息，查看外显子位置。进入引物设计页面，填写相关信息。设置引物参数，如PCR产物大小、跨越外显子等。点击“Get Primers”获取引物序列。结果解读 𐟓Š 在Graphical view of primer pairs部分查看每对引物跨越外显子的情况。在Detailed primer reports部分查看引物质量和匹配情况。通过以上步骤，你就可以轻松完成引物设计啦！𐟎‰

𐟧쐃R与RT-PCR的探秘之旅𐟔 𐟔쥜觔Ÿ物技术的广阔天地里，PCR与RT-PCR都是不可或缺的工具。最近，我深入探索了这两种技术，尤其是RT-PCR，它究竟有何魅力呢？ 𐟒ᩦ–先，RT-PCR与PCR的融合，使得在单个EP管中就能完成逆转录和聚合酶链式反应，这无疑大大简化了操作步骤。然而，这一步也带来了不小的挑战。每次转录一个RNA分子就需要消耗一个逆转录酶，这无疑增加了实验的成本和复杂性。 𐟓š在NCBI的网站上，我找到了许多关于RT-PCR的详细资料。虽然我在理解引物设计方面还有一些疑惑，比如如何选择合适的exon-exon进行设计，以及克隆时如何间接设计引物等。但我相信，随着不断的探索和学习，这些难题都将迎刃而解。 𐟒ꦀ𛧚„来说，RT-PCR以其独特的优势在生物技术领域占据了一席之地。虽然它的一些缺点也让实验者头疼不已，但正是这些挑战激发了我们的探索欲望。 𐟔–PS：在学习之余，也别忘了欣赏一下美丽的风景，比如《铃芽之旅》中的美景，它们也能给我们的心灵带来愉悦和放松哦！

𐟧쥼•物设计全攻略✨ 𐟔 打开PubMed网站，点选NIH，开始你的基因探索之旅！ 𐟒ᠩ€‰择“Gene”，输入你心仪的目的基因，比如mouse、rat或human哦～ 𐟑€ 点击基因名字，进入下一步，别急！ 𐟌 点击NCBI，连接世界基因库，轻松获取信息。 𐟓– 在mRNA and protein区域，找到并点击第一个序号。 𐟒𜠧‚𙥇𛃄S，进入关键步骤，别错过！ 𐟓 复制棕色序列，一定要全部复制，这是关键数据哦！ 𐟚€ 打开生工网站，选择技术服务-常规引物合成，开始你的引物设计之旅！ 𐟖寸点击在线生成引物，选择SYBR，让引物设计更精准。 𐟌 选择物种，输入基因名称，粘贴刚才复制的序列，提交你的设计！ 𐟎‰ 在引物设计列表中查看已提交的序列，等待奇迹出现吧！

降落PCR：解决PCR扩增问题的新方法降落PCR，也被称为TouchDown PCR，是一种常见的PCR优化方法，操作简单且效果显著。MedPeer网站上有详细的解释和视频教程，供大家参考。 𐟌𘠐CR扩增原理在PCR扩增过程中，DNA双链解螺旋成单链后，引物在退火温度下特异性结合到DNA单链上，并在Taq酶的作用下进行延伸。退火温度越高，引物结合的特异性越好；退火温度越低，非特异性片段产生的可能性越高。 𐟌𘠩™落PCR的优势降落PCR通过设定一个较高的初始退火温度，并在每个循环中逐渐降低温度，使得在前期的高温下扩增出特异性片段，而在后期的低温下提高PCR的特异性和效率。 𐟌𘠐CR体系配置（以20ul体系为例） 2x Taq Mix：10ul 引物F/R：0.5ul（可在0.5上下调整）模板：2ul（如果PCR条带不够亮，可以增加一点模板）加水至：20ul 𐟌𘠐CR程序设置预变性：94℃ 3min 循环1：94℃ 30s 循环2：65℃ 30s 循环3：72℃ 30s（10个循环，每个循环退火温度降低1℃至55℃）循环4：94℃ 30s 循环5：55℃ 30s 循环6：72℃ 30s（20-25个循环）延伸：72℃ 10min 保存：4℃至取出跑胶 𐟌𘠥ꌦŠ€术和方案以前做实验前需要查找文献和毕业论文来确定实验方案，做的时候对原理和步骤依旧模糊不清。好在MedPeer网站上提供了各种实验的详细介绍和视频教程，如果早知道这些资源，就不用巴巴地求着师兄师姐和同学教了。

如果研一的时候，有人告诉我这些就好了嘿，大家好！今天想跟大家分享一些我在研究生期间发现的宝藏工具，真的是科研路上的好帮手。如果有人在我研一的时候告诉我这些，估计我的科研之路已经成功一半了！ 1⃣️ 分子生物学软件：SnapGene 首先推荐的是SnapGene，这个软件真的是分子生物学实验员的必备神器。举个例子，以前设计一对引物需要花二十分钟，还得反复比对，生怕出错。现在有了SnapGene，一分钟就能设计出5对引物，效率提升不是一点点。 2⃣️ 数据分析软件：GraphPad 和 Origin 接下来是数据分析软件。GraphPad Prism8和Origin是我常用的两款。特别是GraphPad，做科研汇报和论文作图简直必备。以前我只会用Office作图，质量差不说，放到PPT上还不清晰，经常要改来改去。现在有了GraphPad，作图效率和质量都大大提升。 3⃣️ 修图排版软件：PS和AI 然后是修图和排版软件。Adobe Photoshop和Illustrator真的是绝配。论文图片的排版、修图微调都可以用这两个软件搞定。我自己写论文的时候，也是借助这两个软件进行排版设计的，方便又高效。 4⃣️ 实验protocol查询网站最后分享几个靠谱的实验protocol查询网站。Bio-protocol支持中文，很多protocol都是中文的，非常好用。Nature Protocols、Cold Spring Harbor Protocols、JOVE视频教程、Current Protocols和ProtocolExchange都是非常权威的网站，基本上在实验室里导师没时间教你，师兄师姐不一定会的小技巧都能在这些网站上查到。文献阅读小技巧最后给大家一些文献阅读的小技巧：文献查找分类：知网、谷歌学术、SCI-Hub、Web of Science、Pub Med等都是常用的检索工具。文献泛读：先检索100-200篇相关文献，一般只看abstract部分，然后用有道翻译提炼重点，筛出20-30篇精读。文献精读：先看abstract掌握主要思路，再看result了解作者观点，最后找出创新点，得到属于自己的ideas。希望这些小工具和小技巧能帮到大家，让你们的科研之路少走弯路！如果你们有其他好用的软件或者工具，也欢迎在评论区分享哦！

实验室必备：荧光素光谱查询网站推荐 𐟌ˆ 探索荧光素的光谱世界，一个隐藏在实验室角落的宝藏网站！ 𐟌Ÿ 直观展示发射光谱，帮助你预判荧光素之间的干扰。 𐟔 网站功能强大，可以查询激发光谱和发射光谱，为你的实验提供有力支持。 𐟓Š 网站特色： Combined Ex/Em Graph：结合激发和发射光谱图形，一目了然。 Reset Zoom：调整波长范围，方便查看不同波段的光谱。 Wavelength(nm)：显示波长，帮助你精确定位。 Fluorochromes：列出各种荧光素，方便选择和查询。 Name：为每种荧光素提供名称，方便记忆。 QSearch Fluorochrome：快速搜索特定荧光素。 Save Combination：保存你常用的光谱组合，方便后续使用。 Clear：一键清除所有光谱，轻松开始新查询。 E：激发光谱，Em：发射光谱，Delete：删除不需要的光谱。 𐟔砥𗥥…𗦠功能： Fuorochromes Added：显示已添加的荧光素数量。 Alexa Fluor488：特定荧光素的详细信息。 Alexa Fluor647：更多荧光素的选择。 𐟓š 其他实验室工具网站推荐：实验室没人告诉你的搜论文图片网站实验室没人告诉你的引物网站实验室没人告诉你的搜小分子药物网站实验室没人告诉你的辅助综述网站 𐟔젥ꌦŠ€巧合集： aqPCR合集 ImageJ合集 WB合集石蜡切片和冰冻切片合集

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